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蘇木素染色液的使用方法和使用注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2022-11-30   點(diǎn)擊次數(shù):2734次
  蘇木素染色液是集多種經(jīng)典的蘇木素染液而改進(jìn)生產(chǎn)的,簡化了操作步驟,縮短了操作時(shí)間,而且染色液內(nèi)不使用汞、甲醇、二甲苯等有毒物質(zhì),是一種無毒環(huán)保的染料。可用于組織切片,血涂片,骨髓切片的染色,也能用于細(xì)胞涂片的染色,檢測原理是帶正電荷的堿性染料蘇木素與帶負(fù)電荷的酸性物質(zhì)結(jié)合使其被染成藍(lán)色。
  使用方法
  1.樣本染色前處理
  1)石蠟切片
  ① 脫蠟:二甲苯脫蠟2次,每次10~15 分鐘;
 ?、?水化:95%、70%、30%乙醇各 2 分鐘,溫水2 分鐘。若脫蠟不干凈,需再次溫水2 分鐘。
  2)冰凍切片
 ?、?回溫:將-20℃冰箱保存的冰凍切片取出室溫放置回溫約5~10 分鐘;也可以直接放到37℃孵育箱中進(jìn)行回溫;
  ② 水化:將回溫好的切片放入水中浸泡 30~60 秒左右。
  3)血涂片及骨髓涂片
 ?、?推片:取全血 3 微升左右置載玻片上,將推玻片保持與載玻片 30 度角,置于血滴正前方,稍往后移與血滴接觸,血滴沿推片下緣散開,再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)向前滑動(dòng),至血液鋪完血膜為止。
 ?、?固定與水化:涂片空氣自然干燥后,95%乙醇固定2~3 分鐘,水洗約30~60 秒。
  4)培養(yǎng)細(xì)胞
 ?、?固定:4%多聚甲醛固定10分鐘以上;
 ?、?清洗:蒸餾水洗滌2次,每次2~3分鐘。
  2.染色
  滴加蘇木素染液數(shù)滴蓋滿樣本,染色3~8 分鐘,流水沖洗30~60 秒。即可鏡檢。【注】:染色后的玻片一般可保存一年以上。若想長期保存建議進(jìn)行封片操作。
  3.封片(可選)
  方法一,玻片自然干燥,干后用商業(yè)化封片劑或中性樹膠封片;
  方法二,染色好的玻片無需自然干燥,立即放入無水乙醇中脫水兩次,每次約 5~10 秒,無水乙醇干后即可用商業(yè)化封片劑或中性樹膠封片。
  4.染色結(jié)果
  鏡檢結(jié)果:細(xì)胞核呈藍(lán)紫色。
  注意事項(xiàng)
  1. 染色太淺可再次復(fù)染。染色太深可用 0.05%鹽酸乙醇脫色。
  2. 若做H-E染色(蘇木精-伊紅染色),無需脫色。只需蘇木素染色后,水洗1分鐘后,直接用伊紅染色。
  3. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
  4. 本產(chǎn)品僅作科研用途!
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